La République tchèque a adhéré à l’UNESCO le 22 février 1993.
La bibliothèque nationale tchèque, qui possède six millions d’ouvrages, a été la première lauréate du Prix UNESCO/Kikji Mémoire du monde pour sa contribution à la préservation du patrimoine documentaire et à son accès. Deux collections documentaires du pays ont été inscrites en 2007 au Registre Mémoire du Monde ; les manuscrits médiévaux de la Réforme tchèque et les périodiques émigrés russes, ukrainiens et biélorusses parus entre 1918 et 1945.
La République tchèque a été l’un des initiateurs de l’élaboration de la Convention internationale pour la sauvegarde du patrimoine immatériel. Ses « Slovácko verbŭnk : danses des recrues » ont été proclamées en 2005 Chefs-d’œuvre du patrimoine oral et immatériel.
Six réserves en biosphère sont en train d’exécuter des projets de conservation, de gestion traditionnelle et d’éducation.